超濾親和-液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)是通過受體與有潛在 活性的小分子配體結(jié)合形成配體-受體配合物，與未 結(jié)合的化合物通過超濾膜分離出來，然后配合物中 釋放出結(jié)合的配體化合物，最后通過超高效液相色 譜-串聯(lián)質(zhì)譜（UPLC-MS/MS）進(jìn)行分析鑒定。超濾親和-液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)是一種從天 然產(chǎn)物中篩選生物活性化合物的高效方法 。DHP 恒溫培養(yǎng)箱（上海一恒科學(xué)儀器有限公司）； YXQ 高壓蒸汽滅菌鍋（上海博訊實(shí)業(yè)有限公司）； DL-CJ-2N 超級(jí)工作臺(tái)（北京東聯(lián)哈爾有限公司）； Milli-Q Reference超純水儀（美國(guó)Millipore公司）。

    精密稱取黃芪甲苷、毛 蕊異黃酮葡萄糖苷、毛蕊異黃酮、芒柄花黃素、白術(shù) 內(nèi)酯Ⅰ對(duì)照品適量，分別置于 10 mL 量瓶中，用甲醇 溶解并定容至刻度，配制成質(zhì)量濃度分別為 1.02、 0.97、0.99、1.05、1.09 mg·mL?1 的對(duì)照品溶液，4 ℃避 光保存。使用前，50% 甲醇溶液稀釋到所需的質(zhì)量 濃度。超濾親和篩選只能確 定化合物與靶標(biāo)蛋白有結(jié)合性，但是生物活性還需 進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證。后期本課題組會(huì)深入研究白術(shù) 內(nèi)酯Ⅰ在細(xì)胞水平及動(dòng)物體內(nèi)對(duì) Tim-3 表達(dá)的影響 及作用機(jī)制。