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水解羊血清蛋白分析之水浴鍋使用。

返回列表 來源:未知 發(fā)布日期:2022-09-05 08:57【

    采 用酶解法水解動(dòng)物血液制備生物活性肽成為最常用的方 法,具有價(jià)格低廉、易轉(zhuǎn)化等優(yōu)點(diǎn)。羊血營養(yǎng)價(jià)值豐富,但 目前對(duì)水解羊血清蛋白的研究相對(duì)較少,特別是利用堿性 蛋白酶法水解羊血清蛋白制備生物活性肽的研究鮮見報(bào) 道。本研究采用堿性蛋白酶水解羊血清蛋白,通過測(cè)定酶 解溫度、水解時(shí)間、水解pH值和加酶量對(duì)羊血清蛋白水解 度的影響。721型紫外分光光度計(jì)(惠普有限公司)、TGL-16M高 速臺(tái)式冷凍離心機(jī)(長沙湘儀離心機(jī)儀器有限公司)、 JA2003N電子天平(上海精密科學(xué)儀器有限公司)、HWS28 型電熱恒溫水浴鍋(上海一恒科技有限公司)、PB-10型精 密pH計(jì)(Sartorius公司)。

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    pH值通過影響堿性蛋白酶分子活性部位上相關(guān)基團(tuán) 解離程度,進(jìn)而影響酶的作用,在最適pH時(shí),酶分子上 活性基團(tuán)的解離狀態(tài)與底物結(jié)合最佳,pH 值高于或低于 最適pH時(shí),酶活性基團(tuán)解離程度降低,影響酶和底物的結(jié) 合能力及酶的反應(yīng)速率。因此,確定堿性蛋白酶水解羊血 清蛋白的最適pH值為11。各響應(yīng)面隨著各個(gè)因素增大,羊血 清蛋白的 DH 均呈現(xiàn)先升后降的趨勢(shì),羊血清蛋白的 DH 存在最大值;通過分析各因素之間相互作用對(duì)DH的影響, 確定堿性蛋白酶水解羊血清蛋白的最佳范圍。