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霉菌箱對于多重聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)體系分析。

返回列表 來源:未知 發(fā)布日期:2022-01-10 08:54【

    真菌毒素污染是影響食品安全的重要因素,其中 黃曲霉、寄生曲霉等真菌所產(chǎn)生的黃曲霉素具有高致癌 性、致病性,廣泛存在于玉米、花生、木耳、大豆等食品 中,是威脅人類健康的首要真菌毒素。黃曲霉素產(chǎn) 毒真菌的快速檢測和防治是目前真菌毒素污染領(lǐng)域的 研究熱點。當(dāng)前對黃曲霉素產(chǎn)毒真菌的檢測主要依靠傳 統(tǒng)的形態(tài)學(xué)或免疫學(xué)方法。MJ - 150 - II 型霉菌培養(yǎng)箱、HZQ - X300C 型 恒溫振蕩器、DK - 8D 型三孔電熱恒溫水槽( 上海一恒 科學(xué)儀器有限公司) ; GenoSens 1850 型凝膠成像儀( 北 京勤翔生物技術(shù)有限公司) ; NanoDrop 2000 型超微量分 光光度計( 美國 Thermo Fisher 公司) ; T100 型 PCR 儀( 美國 Bio - Rad 公司) ; GNJS - Ⅱ型菌落計數(shù)器( 上海 谷寧儀器有限公司) 。

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    提取試劑盒考察: 分別用 Ezup 柱式植物基因組 DNA 抽提試劑盒、Ezup 柱式真菌基因組 DNA 抽提試劑 盒提取各菌株 DNA,各菌株 DNA 采用液氮研磨的取材 方式,以 DNA 瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果和 ITS 基因序列結(jié) 果評價提取試劑盒的優(yōu)劣。以真菌為原材料的 DNA 提取主要有菌株凍干粉直 接提取、菌株復(fù)蘇培養(yǎng)后收集菌絲體提取、菌株培養(yǎng)后 菌絲體用液氮研磨后提取等多種方式,本研究中對不同 提取方式均進(jìn)行了嘗試,結(jié)合實際發(fā)現(xiàn),菌株用平皿擴(kuò) 大培養(yǎng)后,刮取菌落用液氮研磨后再提取 DNA,所得總 DNA 質(zhì)量最佳。