1材料與方法 

1.1 材料與試劑 

殼聚糖（脫乙酰度80%），北京中生瑞 泰科技有限公司生產(chǎn)；殼聚糖酶（酶活力40000U/g），諾維 信生物科技有限公司生產(chǎn)；三氯乙酸（分析純），上海展云化工有限公司生產(chǎn)；D-氨基葡萄糖，SIGMA公司生產(chǎn)；氫 氧化鈉、無水亞硫酸鈉、乙酸鈉、乙酸、3，5-二硝基水楊 酸、苯酚、鐵氰化鉀、磷酸二氫鉀等，國藥集團化學(xué)試劑有 限公司生產(chǎn)。 

1.2 儀器 

DL-5低速大容量離心機，上海安亭科學(xué)儀器廠生產(chǎn)；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器RE-52A，上海亞榮生化儀器廠生產(chǎn)； 紫外-可見分光光度計，上海菁華科技儀器有限公司生 產(chǎn)；DK-S22型電熱恒溫水浴鍋，上海精宏實驗設(shè)備有限公司生產(chǎn)；電熱鼓風(fēng)干燥箱，上海一恒科學(xué)儀器有限公司生產(chǎn)；電子天平，上海?？惦娮觾x器廠生產(chǎn)。

2 結(jié)果與分析

在酶濃度為 1600U/g，反應(yīng)時間2h，pH5.4的酶解條件下，得到殼聚糖 酶在不同溫度下水解殼聚糖的效果。還原糖濃度隨溫度的上升而呈現(xiàn)出先增加 后減少的趨勢。其中，在30~35℃，還原糖濃度隨溫度的 上升而緩慢增加；在35~40℃，還原糖濃度隨溫度的上升 而急劇增加，且在40℃還原糖濃度達到最高；當(dāng)溫度高于 40℃，還原糖濃度開始下降，且隨著溫度的持續(xù)增加，還 原糖濃度越來越低。

3 結(jié)論

根據(jù)單因素試驗結(jié)果，將溫度、 pH、殼寡糖酶添加量、反應(yīng)時間作為考察因素，進行正交 試驗。由正交試驗結(jié)果分析可以得出，酶添加量和pH均 對酶解殼聚糖制備殼寡糖產(chǎn)生了較大的影響，其中pH的 影響最為顯著；影響酶解效果的因素主次依次為：pH＞酶 添加量＞反應(yīng)時間＞溫度；利用殼聚糖酶降解殼聚糖制 備殼寡糖的最優(yōu)工藝組合為A1B1C2D2，即溫度35℃、 pH5.0、酶添加量2000U/g、反應(yīng)時間4h。

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